N-acetilcisteína e frutose-1, 6-bisfosfato: efeito imunomodulador em cultura de células mononucleares / N-acetilcisteína e frutose-1,6-bisfosfato: efeito imunomodulador em cultura de células mononucleares

INTRODUCTION: Sepsis is a complex syndrome caused by an uncontrolled systemic inflammatory response. Inflammatory cytokines play a pivotal role in septic shock pathogenesis. Therapeutic strategies have been tested in order to modulate the excessive generation or function of sepsis mediators. OBJECTIVE: The objective of the present study was to investigate the therapeutic effect of N-acetylcysteine (NAC) and its association with fructose-1,6-bisphosphate (FBP) on T-lymphocytes proliferation, interleukin-1β (IL-1β) and monocyte chemotactic protein-1 (MCP-1) levels. MATERIAL AND METHODS: Peripheral blood mononuclear cell samples were isolated from healthy individuals. T-lymphocytes were stimulated with phytohemagglutinin for 96 hours and submitted to different concentrations of NAC or NAC associated with FBP. RESULTS: NAC (10 and 15 mM) and NAC (15 mM) associated with FBP reduced T-lymphocytes proliferation. IL-1β levels rose in the presence of both NAC (15 mM) and NAC with FBP (1.25 mM). MCP-1 levels were reduced only by NAC (15 mM) associated with FBP (1.25 mM). CONCLUSION: The results suggest that both NAC itself and NAC associated with FBP inhibit cellular proliferation, acting as potent immunomodulatory agents, which corroborates its use in the treatment of inflammatory diseases.

INTRODUÇÃO: A sepse é uma síndrome complexa causada pela resposta inflamatória sistêmica descontrolada. As citocinas inflamatórias representam papel central na patogênese do choque séptico. Têm sido testadas estratégias terapêuticas a fim de modular a geração ou a função excessiva de mediadores na sepse. OBJETIVO: O objetivo deste estudo foi investigar o efeito terapêutico da N-acetilcisteína (NAC) e sua associação com a frutose-1,6-bisfosfato (FBP) sobre a proliferação de linfócitos T e a geração de interleucina-1β (IL-1β) e proteína quimiotática de monócitos 1 (MCP-1) em cultura celular. MATERIAL E MÉTODOS: Foram isoladas células mononucleares de sangue periférico de indivíduos saudáveis. Os linfócitos T foram estimulados por 96 horas com fitohemaglutinina e submetidos a diferentes concentrações de NAC ou NAC associada à FBP (1,25 mM). RESULTADOS: O tratamento com NAC (10 e 15 mM) ou NAC (15 mM) associado à FBP reduziu a proliferação celular. Os níveis de IL-1β aumentaram com a presença de NAC (15 mM) e NAC + FBP. A concentração de MCP-1 mostrou-se reduzida apenas no grupo tratado com NAC associada à FBP. CONCLUSÃO: Os resultados sugerem que tanto a NAC quanto a NAC associada à FBP são capazes de inibir a proliferação celular, atuando como potentes agentes imunomoduladores, sugerindo seu uso em doenças inflamatórias.

Comparison of the performance of polymerase chain reaction and pp65 antigenemia for the detection of human cytomegalovirus in immunosuppressed patients.

INTRODUCTION: Human cytomegalovirus (HCMV) is often reactive in latently infected immunosuppressed patients. Accordingly, HCMV remains one of the most common infections following solid organ and hemopoietic stem cell transplantations, resulting in significant morbidity, graft loss and occasional mortality. The early diagnosis of HCMV disease is important in immunosuppressed patients, since in these individuals, preemptive treatment is useful. The objective of this study was to compare the performance of the in-house qualitative polymerase chain reaction (PCR) and pp65 antigenemia to HCMV infection in immunosuppressed patients in the Hospital de Clínicas of Porto Alegre (HCPA). METHODS: A total of 216 blood samples collected between August 2006 and January 2007 were investigated. RESULTS: Among the samples analyzed, 81 (37.5%) were HCMV-positive by PCR, while 48 (22.2%) were positive for antigenemia. Considering antigenemia as the gold standard, sensitivity, specificity, positive predictive values and negative predictive values for PCR were 87.5%, 76.8%, 51.8% and 95.5% respectively. CONCLUSIONS: These results demonstrated that qualitative PCR has high sensitivity and negative predictive value (NPV). Consequently PCR is especially indicated for the initial diagnosis of HCMV infection. In the case of preemptive treatment strategy, identification of patients at high-risk for HCMV disease is fundamental and PCR can be useful tool.

Comparison of the performance of polymerase chain reaction and pp65 antigenemia for the detection of human cytomegalovirus in immunosuppressed patients / Comparação de métodos para detecção de infecção por citomegalovírus em pacientes imunossuprimidos

INTRODUCTION: Human cytomegalovirus (HCMV) is often reactive in latently infected immunosuppressed patients. Accordingly, HCMV remains one of the most common infections following solid organ and hemopoietic stem cell transplantations, resulting in significant morbidity, graft loss and occasional mortality. The early diagnosis of HCMV disease is important in immunosuppressed patients, since in these individuals, preemptive treatment is useful. The objective of this study was to compare the performance of the in-house qualitative polymerase chain reaction (PCR) and pp65 antigenemia to HCMV infection in immunosuppressed patients in the Hospital de Clínicas of Porto Alegre (HCPA). METHODS: A total of 216 blood samples collected between August 2006 and January 2007 were investigated. RESULTS: Among the samples analyzed, 81 (37.5 percent) were HCMV-positive by PCR, while 48 (22.2 percent) were positive for antigenemia. Considering antigenemia as the gold standard, sensitivity, specificity, positive predictive values and negative predictive values for PCR were 87.5 percent, 76.8 percent, 51.8 percent and 95.5 percent respectively. CONCLUSIONS: These results demonstrated that qualitative PCR has high sensitivity and negative predictive value (NPV). Consequently PCR is especially indicated for the initial diagnosis of HCMV infection. In the case of preemptive treatment strategy, identification of patients at high-risk for HCMV disease is fundamental and PCR can be useful tool.

INTRODUÇÃO: O citomegalovírus humano (HCMV), causador de infecção latente, reativa com frequência em pacientes imunossuprimidos. Portanto, o HCMV permanece uma das infecções mais comuns após transplantes de órgãos sólidos e de células hematopoiéticas resultando em significativa morbidade, perda do enxerto e ocasional mortalidade. Assim, o diagnóstico precoce para uma terapia preventiva é de grande importância. Este estudo visa comparar o desempenho dos métodos PCR qualitativo in-house e antigenemia pp65 para o diagnóstico de infecção por CMV em pacientes imunossuprimidos do Hospital de Clínicas de Porto Alegre. MÉTODOS: O estudo foi realizado em 216 amostras de sangue total (EDTA) coletadas de 85 pacientes, entre agosto de 2006 e janeiro de 2007. RESULTADOS: Dentre as 216 amostras analisadas, 81 (37,5 por cento) amostras apresentaram resultados positivos na PCR, enquanto 48 (22,2 por cento) apresentaram resultados positivos na antigenemia. A sensibilidade, especificidade, valor preditivo positivo e valor preditivo negativo para a PCR, considerando antigenemia como padrão foram 87,5 por cento, 76,8 por cento, 51,8 por cento e 95,5 por cento, respectivamente. CONCLUSÕES: Estes resultados demonstraram que a PCR tem alta sensibilidade e valor preditivo negativo. Consequentemente PCR é especialmente indicada para o diagnóstico inicial de infecção por HCMV. No caso da estratégia de terapia preventiva, a identificação de pacientes com alto risco para a doença por HCMV é fundamental e a PCR pode ser uma ferramenta útil.

Comparação dos métodos de reação em cadeia da polimerase qualitativo e antigenemia PP65 para o diagnóstico de infecção por citomegalovírus em pacientes imunossuprimidos / Comparison between qualitative polymerase chain reaction and PP65 antigenemia for the diagnosis of cytomegalovirus infection in immunosuppressed patients

Introdução: A infecção por citomegalovírus (CMV) é freqüente e acomete com significativa morbimortalidade indivíduos imunossuprimidos, especialmente transplantados e pacientes HIV positivos com doença avançada. Objetivo: Este estudo visou a comparar o desempenho dos métodos reação em cadeia da polimerase qualitativo (PCR) e antigenemia pp65 para o diagnóstico de infecção por CMV em pacientes imunossuprimidos. Métodos: O estudo foi realizado em 216 amostras de sangue total coletadas de 85 pacientes, entre agosto de 2006 e janeiro de 2007, provenientes da internação ou ambulatório do Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA). Resultados: Entre as 216 amostras analisadas, 35 amostras apresentaram resultados positivos e 181 amostras apresentaram resultados negativos em uma e/ou outra técnica. Destas 35 amostras positivas, 16 foram positivas em ambas as técnicas; 12 apresentaram-se positivas pela PCR e negativas pela antigenemia; e sete amostras apresentaram-se positivas pela antigenemia e negativas pela PCR. Considerando a antigenemia como padrão-ouro, a técnica de PCR mostrou sensibilidade de 69,6%, especificidade de 93,8%, valor preditivo positivo de 57,1% e valor preditivo negativo de 96,3%. O coeficiente de correlação kappa foi de 0,578. Discussão: Este resultado demonstra que a PCR qualitativa apresenta moderada sensibilidade e alta especificidade para o diagnóstico de infecção para CMV. Apesar de suas limitações, pode ser utilizada para exclusão do diagnóstico em pacientes com suspeita de infecção por CMV, por ser um método mais simples, de baixo custo e de fácil execução.

Introduction: Cytomegalovirus (CMV) infection is frequent and has significant morbidity and mortality in immunosuppressed individuals, especially in transplanted and HIV-positive patients with advanced disease. Objective: This study compared the performance of qualitative polymerase chain reaction (PCR) and pp65 antigenemia methods for the diagnosis of CMV infection in immunosuppressed patients. Methods: A total of 216 of peripheral blood samples were collected from 85 inpatients or outpatients, from August 2006 through January 2007 from Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA). Results: Of the 216 samples, 35 had positive results and 181 were negative with regard to one and/or another technique. Of the 35 positive samples, 16 were positive in both techniques; 12 were positive for PCR and negative for antigenemia, and seven samples were positive for antigenemia but negative for PCR. Considering antigenemia as the gold standard, the PCR technique showed sensitivity of 69.6%, specificity of 93.8%, positive predictive value of 57.1%, and negative predictive value of 96.3%. The kappa correlation coefficient was 0.578. Discussion: These results demonstrate that the qualitative PCR has moderate sensitivity and high specificity for the diagnosis of CMV infection. Despite its limitations, it can be used for diagnosis exclusion in patients under CMV infection suspicion because of its simplicity, low cost and of easy execution.